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युन्नान में औषधीय पौधे पैनाक्स नोटोजिनसेंग की खेती की सुरक्षा के लिए कैडमियम (सीडी) संदूषण एक संभावित खतरा है। बाहरी कैडमियम तनाव की स्थिति में, चूना (0, 750, 2250 और 3750 किलोग्राम/घंटा/वर्ग मीटर) और ऑक्सालिक अम्ल (0, 0.1 और 0.2 मोल/लीटर) के पर्णीय छिड़काव के प्रभाव को समझने के लिए क्षेत्र प्रयोग किए गए। पैनाक्स नोटोजिनसेंग में कैडमियम (Cd) के संचय और एंटीऑक्सीडेंट गुणों पर भी इसका प्रभाव देखा गया। परिणामों से पता चला कि कैडमियम तनाव की स्थिति में, चूना और ऑक्सालिक अम्ल के पर्णीय छिड़काव से पैनाक्स नोटोजिनसेंग में कैल्शियम (Ca2+) की मात्रा बढ़ जाती है और Cd2+ की विषाक्तता कम हो जाती है। चूना और ऑक्सालिक अम्ल के प्रयोग से एंटीऑक्सीडेंट एंजाइमों की सक्रियता बढ़ जाती है और परासरण नियामकों के चयापचय में परिवर्तन आ जाता है। सबसे महत्वपूर्ण परिवर्तन CAT गतिविधि में 2.77 गुना वृद्धि है। ऑक्सालिक अम्ल के प्रभाव में, एसओडी की गतिविधि 1.78 गुना बढ़ गई। एमडीए की मात्रा 58.38% कम हो गई। घुलनशील शर्करा, मुक्त अमीनो अम्ल, प्रोलाइन और घुलनशील प्रोटीन के साथ इसका बहुत महत्वपूर्ण सहसंबंध है। चूना और ऑक्सालिक अम्ल पैनाक्स नोटोजिनसेंग में कैल्शियम आयन (Ca2+) की मात्रा बढ़ा सकते हैं, कैडमियम (Cd) की मात्रा कम कर सकते हैं, पैनाक्स नोटोजिनसेंग की तनाव प्रतिरोधक क्षमता में सुधार कर सकते हैं और कुल सैपोनिन और फ्लेवोनोइड्स के उत्पादन को बढ़ा सकते हैं। कैडमियम (Cd) की मात्रा सबसे कम है, नियंत्रण की तुलना में 68.57% कम है, और मानक मान (Cd≤0.5 mg kg-1, GB/T 19086-2008) के अनुरूप है। एसपीएन का अनुपात 7.73% था, जो सभी उपचारों में उच्चतम स्तर पर था, और फ्लेवोनोइड की मात्रा में 21.74% की उल्लेखनीय वृद्धि हुई, जो मानक औषधीय मूल्यों और इष्टतम उपज तक पहुंच गई।
कैडमियम (Cd) खेती योग्य मिट्टी का एक सामान्य प्रदूषक है, जो आसानी से फैलता है और इसमें महत्वपूर्ण जैविक विषाक्तता होती है। एल-शेफी एट अल2 ने बताया कि कैडमियम विषाक्तता उपयोग किए जाने वाले पौधों की गुणवत्ता और उत्पादकता को प्रभावित करती है। दक्षिण-पश्चिम चीन में खेती योग्य मिट्टी में कैडमियम का अत्यधिक स्तर हाल के वर्षों में गंभीर समस्या बन गया है। युन्नान प्रांत चीन का जैव विविधता का साम्राज्य है, जहां औषधीय पौधों की प्रजातियां देश में पहले स्थान पर हैं। हालांकि, युन्नान प्रांत खनिज संसाधनों से समृद्ध है, और खनन प्रक्रिया से अनिवार्य रूप से मिट्टी में भारी धातु प्रदूषण होता है, जो स्थानीय औषधीय पौधों के उत्पादन को प्रभावित करता है।
पैनाक्स नोटोजिनसेंग (बर्किल) चेन3) अरालियेसी कुल के पैनाक्स जीनस से संबंधित एक अत्यंत मूल्यवान बारहमासी औषधीय जड़ी बूटी है। पैनाक्स नोटोजिनसेंग रक्त परिसंचरण में सुधार करता है, रक्त के जमाव को दूर करता है और दर्द से राहत देता है। इसका मुख्य उत्पादन क्षेत्र युन्नान प्रांत का वेनशान प्रान्त है5। स्थानीय पैनाक्स नोटोजिनसेंग उगाने वाले क्षेत्रों की 75% से अधिक मिट्टी कैडमियम से दूषित है, जिसका स्तर विभिन्न क्षेत्रों में 81% से लेकर 100% से अधिक तक भिन्न होता है6। कैडमियम का विषाक्त प्रभाव पैनाक्स नोटोजिनसेंग के औषधीय घटकों, विशेष रूप से सैपोनिन और फ्लेवोनोइड्स के उत्पादन को भी काफी कम कर देता है। सैपोनिन एक प्रकार का ग्लाइकोसिडिक यौगिक है जिसके एग्लिकोन ट्राइटरपेनोइड्स या स्पाइरोस्टेन्स होते हैं। ये कई पारंपरिक चीनी दवाओं के मुख्य सक्रिय तत्व हैं और इनमें सैपोनिन पाए जाते हैं। कुछ सैपोनिन में जीवाणुरोधी गतिविधि या ज्वरनाशक, शामक और कैंसररोधी जैसे मूल्यवान जैविक गुण भी होते हैं7। फ्लेवोनोइड्स आम तौर पर यौगिकों की एक श्रृंखला को संदर्भित करते हैं जिसमें फेनोलिक हाइड्रॉक्सिल समूहों वाले दो बेंजीन वलय तीन केंद्रीय कार्बन परमाणुओं के माध्यम से जुड़े होते हैं। इसका मुख्य घटक 2-फेनिलक्रोमनोन 8 है। यह एक शक्तिशाली एंटीऑक्सीडेंट है जो पौधों में ऑक्सीजन मुक्त कणों को प्रभावी ढंग से नष्ट कर सकता है। यह सूजन पैदा करने वाले जैविक एंजाइमों के प्रवेश को भी रोक सकता है, घाव भरने और दर्द से राहत दिलाने में सहायक हो सकता है, और कोलेस्ट्रॉल के स्तर को कम कर सकता है। यह पैनाक्स नोटोजिनसेंग के मुख्य सक्रिय तत्वों में से एक है। पैनाक्स जिनसेंग उत्पादन क्षेत्रों की मिट्टी में कैडमियम संदूषण की समस्या का समाधान करना और इसके आवश्यक औषधीय तत्वों का उत्पादन सुनिश्चित करना अत्यंत आवश्यक है।
चूना कैडमियम संदूषण से स्थिर मृदा शुद्धिकरण के लिए व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले निष्क्रिय कारकों में से एक है।¹⁰ यह मिट्टी में कैडमियम के अवशोषण और निक्षेपण को प्रभावित करता है, जिससे मिट्टी में कैडमियम की जैव उपलब्धता कम हो जाती है। यह मिट्टी के pH मान को बढ़ाकर और मिट्टी की धनायन विनिमय क्षमता (CEC), लवण संतृप्ति (BS) और रेडॉक्स विभव (Eh)³ को बदलकर ऐसा करता है।¹¹ इसके अतिरिक्त, चूना बड़ी मात्रा में Ca²⁺ प्रदान करता है, Cd²⁺ के साथ आयनिक प्रतिरोध बनाता है, जड़ों में अवशोषण स्थलों के लिए प्रतिस्पर्धा करता है, मिट्टी में कैडमियम के परिवहन को रोकता है, और इसकी जैविक विषाक्तता कम होती है। जब कैडमियम तनाव की स्थिति में 50 mmol L⁻¹ Ca मिलाया गया, तो तिल की पत्तियों में कैडमियम का परिवहन बाधित हुआ और कैडमियम संचय 80% तक कम हो गया। चावल (ओरिज़ा सैटिवा एल.) और अन्य फसलों में भी इसी तरह के कई अध्ययन प्रकाशित हुए हैं।¹²,¹³
फसलों में भारी धातुओं के संचय को नियंत्रित करने के लिए पत्तियों पर छिड़काव करना हाल के वर्षों में भारी धातुओं को नियंत्रित करने की एक नई विधि है। इसका सिद्धांत मुख्य रूप से पादप कोशिकाओं में होने वाली कीलेशन प्रतिक्रिया से संबंधित है, जिसके परिणामस्वरूप भारी धातुएं कोशिका भित्ति पर जमा हो जाती हैं और पौधों द्वारा भारी धातुओं के अवशोषण को रोकती हैं14,15। एक स्थिर डाइएसिड कीलेटिंग एजेंट के रूप में, ऑक्सालिक अम्ल पौधों में भारी धातु आयनों को सीधे कीलेट कर सकता है, जिससे विषाक्तता कम हो जाती है। शोध से पता चला है कि सोयाबीन में ऑक्सालिक अम्ल Cd2+ को कीलेट कर सकता है और ऊपरी ट्राइकोम कोशिकाओं के माध्यम से Cd युक्त क्रिस्टल मुक्त कर सकता है, जिससे शरीर में Cd2+ का स्तर कम हो जाता है16। ऑक्सालिक अम्ल मृदा के पीएच को नियंत्रित कर सकता है, सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज (SOD), पेरोक्सीडेज (POD) और कैटालेज (CAT) की गतिविधि को बढ़ा सकता है, और घुलनशील शर्करा, घुलनशील प्रोटीन, मुक्त अमीनो अम्ल और प्रोलाइन के प्रवेश को नियंत्रित कर सकता है। यह चयापचय नियामक है17,18। पौधे में अम्ल और अतिरिक्त Ca2+ न्यूक्लियेटिंग प्रोटीन की क्रिया के तहत कैल्शियम ऑक्सालेट अवक्षेप बनाते हैं। पौधों में Ca2+ सांद्रता को विनियमित करने से पौधों में घुलित ऑक्सालिक अम्ल और Ca2+ का प्रभावी विनियमन प्राप्त किया जा सकता है और ऑक्सालिक अम्ल और Ca2+19,20 के अत्यधिक संचय से बचा जा सकता है।
प्रयोग में चूने की मात्रा, सुधार प्रभाव को प्रभावित करने वाले प्रमुख कारकों में से एक है। यह पाया गया कि चूने की खुराक 750 से 6000 किलोग्राम/मीटर² तक होती है। 5.0~5.5 के pH वाले अम्लीय मिट्टी के लिए, 3000~6000 किलोग्राम/घंटा/मीटर² की खुराक पर चूना लगाने का प्रभाव 750 किलोग्राम/घंटा/मीटर² की खुराक की तुलना में काफी अधिक होता है²¹। हालांकि, चूने के अत्यधिक प्रयोग से मिट्टी पर कुछ नकारात्मक प्रभाव पड़ते हैं, जैसे कि मिट्टी के pH में महत्वपूर्ण परिवर्तन और मिट्टी का संघनन²²। इसलिए, हमने CaO उपचार स्तरों को 0, 750, 2250 और 3750 किलोग्राम/मीटर² के रूप में परिभाषित किया। जब अरेबिडोप्सिस थालियाना पर ऑक्सालिक एसिड का प्रयोग किया गया, तो यह पाया गया कि 10 mmol L⁻¹ की सांद्रता पर Ca²⁺ में काफी कमी आई, और Ca²⁺ सिग्नलिंग को प्रभावित करने वाले CRT जीन परिवार ने जोरदार प्रतिक्रिया दी²⁰। कुछ पूर्व अध्ययनों के संकलन से हमें इस परीक्षण की सांद्रता निर्धारित करने और Ca2+ और Cd2+23,24,25 पर बाह्य पूरक पदार्थों की परस्पर क्रिया के प्रभाव का आगे अध्ययन करने की अनुमति मिली। अतः, इस अध्ययन का उद्देश्य कैडमियम-दूषित मिट्टी में पैनाक्स नोटोजिनसेंग की कैडमियम सामग्री और तनाव सहनशीलता पर बाह्य चूने और ऑक्सालिक एसिड के पत्ती छिड़काव के नियामक तंत्र का पता लगाना और औषधीय गुणवत्ता और प्रभावकारिता को बेहतर ढंग से सुनिश्चित करने के तरीकों का पता लगाना है। यह अध्ययन कैडमियम-दूषित मिट्टी में शाकीय पौधों की खेती के पैमाने को बढ़ाने और दवा बाजार द्वारा अपेक्षित उच्च-गुणवत्ता, टिकाऊ उत्पादन प्राप्त करने के लिए मूल्यवान मार्गदर्शन प्रदान करता है।
स्थानीय जिनसेंग किस्म वेनशान पैनाक्स नोटोजिनसेंग को सामग्री के रूप में उपयोग करते हुए, युन्नान प्रांत के वेनशान प्रान्त के किउबेई काउंटी के लानिझाई (24°11′N, 104°3′E, ऊंचाई 1446 मीटर) में एक क्षेत्र प्रयोग किया गया। औसत वार्षिक तापमान 17°C और औसत वार्षिक वर्षा 1250 मिमी है। अध्ययन की गई मिट्टी के पृष्ठभूमि मान इस प्रकार थे: TN 0.57 g kg-1, TP 1.64 g kg-1, TC 16.31 g kg-1, OM 31.86 g kg-1, क्षार द्वारा जलीकृत N 88.82 mg kg-1, मुक्त फास्फोरस 18.55 mg kg-1, मुक्त पोटेशियम 100.37 mg kg-1, कुल कैडमियम 0.3 mg kg-1, pH 5.4।
10 दिसंबर 2017 को, 6 मिलीग्राम/किलोग्राम Cd2+ (CdCl2·2.5H2O) और चूने के उपचार (0, 750, 2250 और 3750 किलोग्राम/घंटा/वर्ग मीटर) को मिलाकर प्रत्येक प्लॉट की 0~10 सेंटीमीटर मोटी परत में मिट्टी की सतह पर डाला गया। प्रत्येक उपचार को 3 बार दोहराया गया। परीक्षण प्लॉट यादृच्छिक रूप से स्थित थे, प्रत्येक प्लॉट 3 वर्ग मीटर क्षेत्र में फैला हुआ था। एक वर्ष पुराने पैनाक्स नोटोजिनसेंग के पौधों को जुताई के 15 दिन बाद रोपा गया। जब धूप से बचाव के लिए जाली का उपयोग किया गया, तो जाली के अंदर पैनाक्स नोटोजिनसेंग को मिलने वाली प्रकाश की तीव्रता सामान्य प्राकृतिक प्रकाश की तीव्रता का लगभग 18% थी। खेती स्थानीय पारंपरिक खेती विधियों के अनुसार की गई। 2019 में पैनाक्स नोटोजिनसेंग के पकने से पहले, सोडियम ऑक्सालेट के रूप में ऑक्सालिक एसिड का छिड़काव किया गया। ऑक्सालिक अम्ल की सांद्रता क्रमशः 0, 0.1 और 0.2 मोल एल-1 थी, और NaOH का उपयोग pH को 5.16 पर समायोजित करने के लिए किया गया था ताकि पत्ती के कचरे से निकलने वाले घोल के औसत pH का अनुकरण किया जा सके। पत्तियों की ऊपरी और निचली सतहों पर सप्ताह में एक बार सुबह 8:00 बजे छिड़काव करें। पाँचवें सप्ताह में चार बार छिड़काव करने के बाद, तीन साल पुराने पैनाक्स नोटोजिनसेंग पौधों की कटाई की गई।
नवंबर 2019 में, तीन साल पुराने पैनाक्स नोटोजिनसेंग के पौधों को खेत से एकत्र किया गया और उन पर ऑक्सालिक एसिड का छिड़काव किया गया। शारीरिक चयापचय और एंजाइम गतिविधि के मापन के लिए आवश्यक तीन साल पुराने पैनाक्स नोटोजिनसेंग पौधों के कुछ नमूनों को फ्रीजिंग के लिए ट्यूबों में रखा गया। इन्हें तरल नाइट्रोजन से तुरंत जमाया गया और फिर -80°C पर रेफ्रिजरेटर में स्थानांतरित कर दिया गया। परिपक्वता अवस्था में कैडमियम (Cd) और सक्रिय संघटक सामग्री के मापन के लिए कुछ जड़ के नमूनों को नल के पानी से धोया गया, 105°C पर 30 मिनट तक सुखाया गया, 75°C पर स्थिर वजन तक रखा गया और भंडारण के लिए मोर्टार में पीस लिया गया।
0.2 ग्राम सूखे पौधे के नमूने का वजन करें, इसे एक एर्लेनमेयर फ्लास्क में रखें, इसमें 8 मिलीलीटर HNO3 और 2 मिलीलीटर HClO4 मिलाएं और रात भर के लिए ढक दें। अगले दिन, एर्लेनमेयर फ्लास्क में रखे घुमावदार फ़नल का उपयोग करके विद्युततापीय पाचन प्रक्रिया तब तक करें जब तक सफेद धुआं दिखाई न दे और पाचक रस साफ न निकलने लगे। कमरे के तापमान पर ठंडा होने के बाद, मिश्रण को 10 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित कर दिया गया। कैडमियम (Cd) की मात्रा का निर्धारण परमाणु अवशोषण स्पेक्ट्रोमीटर (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA) का उपयोग करके किया गया। (GB/T 23739-2009)।
0.2 ग्राम सूखे पौधे के नमूने का वजन करें, इसे 50 मिलीलीटर की प्लास्टिक की बोतल में डालें, 10 मिलीलीटर में 1 मोल एल-1 एचसीएल मिलाएं, बोतल को बंद करें और 15 घंटे तक अच्छी तरह हिलाएं और छान लें। पिपेट का उपयोग करके, आवश्यक मात्रा में फ़िल्ट्रेट निकालें, इसे आवश्यकतानुसार पतला करें और SrCl2 घोल मिलाकर Sr2+ की सांद्रता को 1 ग्राम एल-1 तक लाएं। कैल्शियम की मात्रा को परमाणु अवशोषण स्पेक्ट्रोमीटर (Thermo ICE™ 3300 AAS, USA) का उपयोग करके मापा गया।
मैलोंडिएल्डिहाइड (एमडीए), सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज़ (एसओडी), पेरोक्सीडेज़ (पीओडी) और कैटालेज़ (कैट) संदर्भ किट विधि (डीएनएम-9602, बीजिंग प्रोंग न्यू टेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड, उत्पाद पंजीकरण) के लिए संबंधित मापन किट का उपयोग करें। क्रमांक: बीजिंग फार्माकोपिया (सटीक) 2013 क्रमांक 2400147।
पैनाक्स नोटोजिनसेंग के नमूने का लगभग 0.05 ग्राम वजन करें और ट्यूब के किनारों पर एंथ्रोन-सल्फ्यूरिक एसिड अभिकर्मक डालें। तरल को अच्छी तरह मिलाने के लिए ट्यूब को 2-3 सेकंड तक हिलाएं। रंग विकसित होने के लिए ट्यूब को 15 मिनट के लिए ट्यूब रैक पर रखें। घुलनशील शर्करा की मात्रा का निर्धारण पराबैंगनी-दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शंघाई युआनक्सी इंस्ट्रूमेंट कंपनी लिमिटेड, चीन) द्वारा 620 एनएम की तरंगदैर्ध्य पर किया गया।
पैनाक्स नोटोजिनसेंग के ताजे नमूने का 0.5 ग्राम तौलें, इसे 5 मिलीलीटर आसुत जल के साथ पीसकर समरूप पेस्ट बना लें, और फिर 10 मिनट के लिए 10,000 ग्राम पर सेंट्रीफ्यूज करें। सुपरनेटेंट को एक निश्चित आयतन तक पतला करें। कूमासी ब्रिलियंट ब्लू विधि का उपयोग किया गया। घुलनशील प्रोटीन की मात्रा को पराबैंगनी-दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शंघाई युआनक्सी इंस्ट्रूमेंट कंपनी लिमिटेड, चीन) का उपयोग करके 595 एनएम की तरंगदैर्ध्य पर मापा गया और बोवाइन सीरम एल्ब्यूमिन के मानक वक्र के आधार पर गणना की गई।
ताजे नमूने का 0.5 ग्राम तौलें, उसमें 10% एसिटिक एसिड के 5 मिलीलीटर मिलाएं, एक समरूप पेस्ट बनने तक पीसें, छानें और स्थिर आयतन तक पतला करें। निन्हिड्रिन विलयन के साथ रंग विकास विधि का प्रयोग किया गया। मुक्त अमीनो अम्ल की मात्रा यूवी-विजिबल स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (यूवी-5800, शंघाई युआनक्सी इंस्ट्रूमेंट कंपनी लिमिटेड, चीन) द्वारा 570 एनएम पर निर्धारित की गई और ल्यूसीन मानक वक्र28 के आधार पर गणना की गई।
ताजे नमूने का 0.5 ग्राम तौलें, उसमें सल्फोसैलिसिलिक अम्ल के 3% विलयन का 5 मिलीलीटर मिलाएं, जल स्नान में गर्म करें और 10 मिनट तक हिलाएं। ठंडा होने के बाद, विलयन को छानकर स्थिर आयतन तक लाया गया। अम्ल निन्हिड्रिन के साथ रंगमापी विधि का प्रयोग किया गया। प्रोलाइन की मात्रा पराबैंगनी-दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शंघाई युआनक्सी इंस्ट्रूमेंट कंपनी लिमिटेड, चीन) द्वारा 520 एनएम तरंगदैर्ध्य पर निर्धारित की गई और प्रोलाइन मानक वक्र29 के आधार पर गणना की गई।
सैपोनिन की मात्रा का निर्धारण पीपुल्स रिपब्लिक ऑफ चाइना की फार्माकोपिया (2015 संस्करण) के संदर्भ में उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा किया गया था। उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी का मूल सिद्धांत गतिशील चरण के रूप में उच्च-दबाव वाले तरल का उपयोग करना और स्थिर चरण के लिए उच्च-प्रदर्शन स्तंभ क्रोमैटोग्राफी की अतिसूक्ष्म कण पृथक्करण तकनीक को लागू करना है। संचालन तकनीक इस प्रकार है:
एचपीएलसी की शर्तें और प्रणाली उपयुक्तता परीक्षण (तालिका 1): फिलर के रूप में ऑक्टाडेसिलसिलैन-बद्ध सिलिका जेल, मोबाइल फेज ए के रूप में एसीटोनिट्राइल और मोबाइल फेज बी के रूप में पानी का उपयोग करें। नीचे दी गई तालिका के अनुसार ग्रेडिएंट इल्यूशन करें। डिटेक्शन तरंगदैर्ध्य 203 एनएम है। पैनाक्स नोटोजिनसेंग के कुल सैपोनिन के आर1 शिखर के अनुसार, सैद्धांतिक प्लेटों की संख्या कम से कम 4000 होनी चाहिए।
मानक विलयन की तैयारी: जिनसोनोसाइड Rg1, जिनसोनोसाइड Rb1 और नोटोजिनसोनोसाइड R1 को सटीक रूप से तौलें और मेथनॉल मिलाकर एक मिश्रण तैयार करें जिसमें प्रति 1 मिलीलीटर विलयन में 0.4 मिलीग्राम जिनसोनोसाइड Rg1, 0.4 मिलीग्राम जिनसोनोसाइड Rb1 और 0.1 मिलीग्राम नोटोजिनसोनोसाइड R1 हो।
परीक्षण विलयन की तैयारी: 0.6 ग्राम पैनाक्स जिनसेंग पाउडर का वजन करें और उसमें 50 मिलीलीटर मेथनॉल मिलाएं। मिश्रित विलयन का वजन (W1) करें और इसे रात भर के लिए छोड़ दें। फिर इस विलयन को 80°C के जल स्नान में 2 घंटे तक धीमी आंच पर उबालें। ठंडा होने के बाद, मिश्रित विलयन का वजन करें और तैयार मेथनॉल को पहले से तैयार मात्रा (W1) में मिला दें। फिर अच्छी तरह से हिलाएं और छान लें। विश्लेषण के लिए छने हुए घोल को अलग रख दें।
मानक विलयन के 10 μL और फ़िल्ट्रेट के 10 μL को सटीक रूप से एकत्र करें और सैपोनिन 24 सामग्री निर्धारित करने के लिए उन्हें एक उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफ (थर्मो एचपीएलसी-अल्टीमेट 3000, सीमोर फिशर टेक्नोलॉजी कंपनी लिमिटेड) में इंजेक्ट करें।
मानक वक्र: Rg1, Rb1 और R1 के मिश्रित मानक विलयन का मापन। क्रोमैटोग्राफी की स्थितियाँ ऊपर बताई गई स्थितियों के समान हैं। y-अक्ष पर मापे गए शिखर क्षेत्रफल और x-अक्ष पर मानक विलयन में सैपोनिन की सांद्रता को प्लॉट करके मानक वक्र की गणना करें। नमूने के मापे गए शिखर क्षेत्रफल को मानक वक्र में प्रतिस्थापित करके सैपोनिन की सांद्रता की गणना की जा सकती है।
0.1 ग्राम पी. नोटोजेनसिंग नमूने का वजन करें और उसमें 50 मिलीलीटर 70% CH3OH विलयन मिलाएं। 2 घंटे तक अल्ट्रासोनिक निष्कर्षण किया गया, जिसके बाद 10 मिनट के लिए 4000 आरपीएम पर सेंट्रीफ्यूगेशन किया गया। 1 मिलीलीटर सुपरनेटेंट लें और इसे 12 गुना पतला करें। 249 एनएम तरंगदैर्ध्य पर पराबैंगनी-दृश्य स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री (UV-5800, शंघाई युआनक्सी इंस्ट्रूमेंट कंपनी लिमिटेड, चीन) का उपयोग करके फ्लेवोनोइड सामग्री का निर्धारण किया गया। क्वेरसेटिन मानक सामान्य पदार्थों में से एक है।8
डेटा को Excel 2010 सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके व्यवस्थित किया गया था। डेटा पर विचरण विश्लेषण करने के लिए SPSS 20 सांख्यिकी सॉफ़्टवेयर का उपयोग किया गया था। चित्र Origin Pro 9.1 का उपयोग करके बनाए गए थे। परिकलित सांख्यिकीय मानों में माध्य ± मानक विचलन शामिल हैं। सांख्यिकीय महत्व के कथन P < 0.05 पर आधारित हैं।
पत्तियों पर छिड़के गए ऑक्सालिक एसिड की समान सांद्रता पर, पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में कैल्शियम की मात्रा चूने की मात्रा बढ़ने के साथ काफी बढ़ गई (तालिका 2)। चूने की अनुपस्थिति की तुलना में, ऑक्सालिक एसिड का छिड़काव किए बिना 3750 kg/h/m2 चूना डालने पर कैल्शियम की मात्रा में 212% की वृद्धि हुई। चूने की समान मात्रा के लिए, ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव की सांद्रता बढ़ने पर कैल्शियम की मात्रा में मामूली वृद्धि हुई।
जड़ों में कैडमियम (Cd) की मात्रा 0.22 से 0.70 मिलीग्राम/किलोग्राम तक होती है। ऑक्सालिक अम्ल की समान छिड़काव सांद्रता पर, चूने की मात्रा बढ़ने के साथ, 2250 किलोग्राम/घंटा की दर पर Cd की मात्रा में उल्लेखनीय कमी आती है। नियंत्रण की तुलना में, 2250 किलोग्राम/मीटर² चूने और 0.1 मोल/लीटर ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव के बाद जड़ों में Cd की मात्रा 68.57% कम हो गई। जब बिना चूने के और 750 किलोग्राम/घंटा की दर से चूना डाला गया, तो ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव की सांद्रता बढ़ने के साथ पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में Cd की मात्रा में उल्लेखनीय कमी आई। जब 2250 किलोग्राम/मीटर² और 3750 किलोग्राम/मीटर² चूना डाला गया, तो जड़ों में Cd की मात्रा पहले घटी और फिर ऑक्सालिक अम्ल की सांद्रता बढ़ने के साथ बढ़ी। इसके अतिरिक्त, द्विवरीय विश्लेषण से पता चला कि चूने का पैनाक्स नोटोजिनसेंग जड़ों में कैल्शियम की मात्रा पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा (एफ = 82.84**), चूने का पैनाक्स नोटोजिनसेंग जड़ों में कैडमियम की मात्रा पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा (एफ = 74.99**), और ऑक्सालिक एसिड पर भी महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा (एफ = 7.72*)।
चूने की मात्रा और छिड़के गए ऑक्सालिक एसिड की सांद्रता बढ़ने पर एमडीए की मात्रा में उल्लेखनीय कमी आई। बिना चूना मिलाए और 3750 किलोग्राम/वर्ग मीटर चूना मिलाने पर पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में एमडीए की मात्रा में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं देखा गया। 750 किलोग्राम/घंटा/वर्ग मीटर और 2250 किलोग्राम/घंटा/वर्ग मीटर की दर से छिड़काव करने पर, 0.2 मोल/लीटर ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव से चूने की मात्रा बिना ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव की तुलना में क्रमशः 58.38% और 40.21% कम हो गई। सबसे कम एमडीए मात्रा (7.57 नैनोमोल ग्राम) 750 किलोग्राम वर्ग मीटर चूना और 0.2 मोल लीटर ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव पर देखी गई (चित्र 1)।
कैडमियम तनाव के तहत पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में मैलोंडिएल्डिहाइड की मात्रा पर ऑक्सालिक एसिड के पर्णीय छिड़काव का प्रभाव। नोट: चित्र में दिए गए संकेत छिड़काव के समय ऑक्सालिक एसिड की सांद्रता (मोल एल-1) दर्शाते हैं, अलग-अलग छोटे अक्षर समान चूने के प्रयोग के विभिन्न उपचारों के बीच महत्वपूर्ण अंतर दर्शाते हैं (P < 0.05)। नीचे भी यही लागू होता है।
3750 kg/h चूने के प्रयोग को छोड़कर, पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में एसओडी गतिविधि में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं देखा गया। 0, 750 और 2250 kg/h/m2 चूने की मात्रा मिलाने पर, 0.2 mol/l की सांद्रता पर ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव द्वारा उपचारित जड़ों में एसओडी गतिविधि, ऑक्सालिक अम्ल के प्रयोग के बिना उपचारित जड़ों की तुलना में काफी अधिक थी, जो क्रमशः 177.89%, 61.62% और 45.08% बढ़ी। जड़ों में एसओडी गतिविधि (598.18 U g-1) चूने के प्रयोग के बिना और 0.2 mol/l की सांद्रता पर ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव द्वारा उपचारित जड़ों में सबसे अधिक थी। जब ऑक्सालिक अम्ल को समान सांद्रता या 0.1 mol L-1 पर छिड़काव किया गया, तो चूने की मात्रा बढ़ने के साथ एसओडी गतिविधि में वृद्धि हुई। 0.2 mol/L ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव के बाद, एसओडी गतिविधि में उल्लेखनीय कमी आई (चित्र 2)।
कैडमियम तनाव के तहत पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेस, पेरोक्सीडेस और कैटालेज की गतिविधि पर पत्तियों पर ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव का प्रभाव
जड़ों में एसओडी गतिविधि की तरह, बिना चूने के उपचारित और 0.2 मोल एल-1 ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव वाली जड़ों में पीओडी गतिविधि सबसे अधिक (63.33 µmol g-1) थी, जो नियंत्रण (25.50 µmol g-1) से 148.35% अधिक है। ऑक्सालिक एसिड स्प्रे की सांद्रता बढ़ने और 3750 kg/m2 चूने के उपचार के साथ, पीओडी गतिविधि पहले बढ़ी और फिर घटी। 0.1 मोल एल-1 ऑक्सालिक एसिड के उपचार की तुलना में, 0.2 मोल एल-1 ऑक्सालिक एसिड के उपचार पर पीओडी गतिविधि में 36.31% की कमी आई (चित्र 2)।
0.2 मोल/लीटर ऑक्सालिक एसिड का छिड़काव करने और 2250 किलोग्राम/घंटा/वर्ग मीटर या 3750 किलोग्राम/घंटा/वर्ग मीटर चूना मिलाने के अपवाद स्वरूप, CAT गतिविधि नियंत्रण की तुलना में काफी अधिक थी। 0.1 मोल/लीटर ऑक्सालिक एसिड का छिड़काव करने और 0.2250 किलोग्राम/वर्ग मीटर या 3750 किलोग्राम/घंटा/वर्ग मीटर चूना मिलाने पर, ऑक्सालिक एसिड का छिड़काव न करने की तुलना में CAT गतिविधि में क्रमशः 276.08%, 276.69% और 33.05% की वृद्धि हुई। जड़ों में CAT गतिविधि बिना चूने वाले उपचार और 0.2 मोल/लीटर ऑक्सालिक एसिड वाले उपचार में सबसे अधिक (803.52 माइक्रोमोल/ग्राम) थी। जब चूने की मात्रा 3750 kg/h/m और 0.2 mol/L ऑक्सालिक एसिड से उपचारित किया गया तो CAT गतिविधि सबसे कम (172.88 μmol/g) थी (चित्र 2)।
द्विवरीय विश्लेषण से पता चला कि पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में CAT गतिविधि और MDA गतिविधि, छिड़के गए ऑक्सालिक एसिड या चूने की मात्रा और दोनों उपचारों से महत्वपूर्ण रूप से संबंधित थीं (तालिका 3)। जड़ों में SOD गतिविधि चूने और ऑक्सालिक एसिड के उपचार या ऑक्सालिक एसिड स्प्रे की सांद्रता से महत्वपूर्ण रूप से संबंधित थी। जड़ POD गतिविधि, लगाए गए चूने की मात्रा या चूने और ऑक्सालिक एसिड के उपचार पर महत्वपूर्ण रूप से निर्भर थी।
चूने की मात्रा और ऑक्सालिक एसिड स्प्रे की सांद्रता बढ़ने के साथ जड़ों में घुलनशील शर्करा की मात्रा कम हो गई। बिना चूने के प्रयोग और 750 kg/h/m² चूने के प्रयोग के बाद पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में घुलनशील शर्करा की मात्रा में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था। जब 2250 kg/m² चूने का प्रयोग किया गया, तो 0.2 mol/L ऑक्सालिक एसिड से उपचारित जड़ों में घुलनशील शर्करा की मात्रा बिना ऑक्सालिक एसिड के प्रयोग की तुलना में काफी अधिक थी, जो 22.81% तक बढ़ गई। जब 3750 kg h/m² चूने का प्रयोग किया गया, तो ऑक्सालिक एसिड की सांद्रता बढ़ने के साथ घुलनशील शर्करा की मात्रा में काफी कमी आई। 0.2 mol L⁻¹ ऑक्सालिक एसिड से उपचारित जड़ों में घुलनशील शर्करा की मात्रा बिना ऑक्सालिक एसिड के प्रयोग की तुलना में 38.77% तक कम हो गई। इसके अलावा, 0.2 मोल·एल-1 ऑक्सालिक एसिड स्प्रे उपचार में सबसे कम घुलनशील चीनी सामग्री थी, जो 205.80 मिलीग्राम·जी-1 थी (चित्र 3)।
कैडमियम तनाव की स्थिति में पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में घुलनशील कुल शर्करा और घुलनशील प्रोटीन की मात्रा पर ऑक्सालिक एसिड के पर्णीय छिड़काव का प्रभाव
चूने की मात्रा बढ़ने और ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव से जड़ों में घुलनशील प्रोटीन की मात्रा कम हो गई। बिना चूने के, 0.2 मोल लीटर की सांद्रता पर ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव से उपचारित करने पर घुलनशील प्रोटीन की मात्रा नियंत्रण की तुलना में 16.20% तक काफी कम हो गई। 750 किलोग्राम/घंटा की दर से चूना डालने पर पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में घुलनशील प्रोटीन की मात्रा में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं देखा गया। 2250 किलोग्राम/घंटा/मीटर की दर से चूना डालने पर, 0.2 मोल लीटर ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव से उपचारित जड़ों में घुलनशील प्रोटीन की मात्रा बिना ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव वाली जड़ों की तुलना में काफी अधिक (35.11%) पाई गई। जब 3750 kg·h/m2 चूने का प्रयोग किया गया, तो ऑक्सालिक एसिड स्प्रे की सांद्रता बढ़ने के साथ घुलनशील प्रोटीन की मात्रा में उल्लेखनीय कमी आई, और सबसे कम घुलनशील प्रोटीन की मात्रा (269.84 μg·g-1) तब पाई गई जब ऑक्सालिक एसिड स्प्रे 0.2 mol·L-1 था। उपचार (चित्र 3)।
चूने के प्रयोग के अभाव में पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ में मुक्त अमीनो अम्लों की मात्रा में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं पाया गया। ऑक्सालिक अम्ल की छिड़काव सांद्रता बढ़ने और 750 किलोग्राम/हेक्टेयर/वर्ग मीटर चूना मिलाने पर मुक्त अमीनो अम्लों की मात्रा पहले घटी और फिर बढ़ी। ऑक्सालिक अम्ल का छिड़काव न करने की तुलना में, 2250 किलोग्राम वर्ग मीटर चूना और 0.2 मोल लीटर ऑक्सालिक अम्ल का छिड़काव करने पर मुक्त अमीनो अम्लों की मात्रा में 33.58% की उल्लेखनीय वृद्धि हुई। ऑक्सालिक अम्ल की छिड़काव सांद्रता बढ़ने और 3750 किलोग्राम/हेक्टेयर चूना मिलाने पर मुक्त अमीनो अम्लों की मात्रा में उल्लेखनीय कमी आई। 0.2 मोल लीटर ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव से मुक्त अमीनो अम्लों की मात्रा, बिना ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव की तुलना में 49.76% कम हो गई। ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव के अभाव में मुक्त अमीनो अम्लों की मात्रा सबसे अधिक थी, जो 2.09 मिलीग्राम ग्राम थी। 0.2 मोल/लीटर ऑक्सालिक एसिड स्प्रे उपचार में सबसे कम मुक्त अमीनो एसिड सामग्री (1.05 मिलीग्राम/ग्राम) थी (चित्र 4)।
कैडमियम तनाव की स्थिति में पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में मुक्त अमीनो एसिड और प्रोलाइन की मात्रा पर पत्तियों पर ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव का प्रभाव
चूने की मात्रा और ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव की मात्रा बढ़ने के साथ जड़ों में प्रोलाइन की मात्रा कम हो गई। चूने का प्रयोग न करने पर पैनाक्स जिनसेंग की जड़ में प्रोलाइन की मात्रा में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं देखा गया। ऑक्सालिक अम्ल की सांद्रता बढ़ने और 750 या 2250 किलोग्राम/वर्ग मीटर चूने की मात्रा बढ़ने पर प्रोलाइन की मात्रा पहले घटी और फिर बढ़ी। 0.2 मोल लीटर ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव से प्राप्त प्रोलाइन की मात्रा 0.1 मोल लीटर ऑक्सालिक अम्ल के छिड़काव से प्राप्त प्रोलाइन की मात्रा की तुलना में काफी अधिक थी, जो क्रमशः 19.52% और 44.33% बढ़ी। 3750 किलोग्राम/वर्ग मीटर चूना डालने पर, छिड़काव किए गए ऑक्सालिक अम्ल की सांद्रता बढ़ने के साथ प्रोलाइन की मात्रा में उल्लेखनीय कमी आई। 0.2 मोल लीटर ऑक्सालिक अम्ल का छिड़काव करने के बाद, बिना छिड़काव वाली स्थिति की तुलना में प्रोलाइन की मात्रा में 54.68% की कमी आई। सबसे कम प्रोलाइन सामग्री 0.2 मोल/लीटर ऑक्सालिक एसिड के साथ उपचारित करने पर पाई गई और यह 11.37 माइक्रोग्राम/ग्राम थी (चित्र 4)।
पैनाक्स नोटोजिनसेंग में कुल सैपोनिन की मात्रा Rg1>Rb1>R1 है। ऑक्सालिक एसिड स्प्रे की बढ़ती सांद्रता और चूने के प्रयोग के बिना सांद्रता के साथ तीनों सैपोनिन की मात्रा में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था (तालिका 4)।
0.2 मोल लीटर ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव के बाद R1 की मात्रा, ऑक्सालिक एसिड का छिड़काव न करने और 750 या 3750 किलोग्राम/वर्ग मीटर चूने की मात्रा का प्रयोग करने की तुलना में काफी कम थी। 0 या 0.1 मोल/लीटर ऑक्सालिक एसिड की सांद्रता पर, चूने की मात्रा बढ़ाने से R1 की मात्रा में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं देखा गया। 0.2 मोल/लीटर ऑक्सालिक एसिड की सांद्रता पर, 3750 किलोग्राम/घंटा/वर्ग मीटर चूने में R1 की मात्रा, बिना चूना मिलाए प्राप्त 43.84% की तुलना में काफी कम थी (तालिका 4)।
ऑक्सालिक एसिड की स्प्रे सांद्रता बढ़ने और 750 kg/m2 चूना मिलाने पर, Rg1 की मात्रा पहले बढ़ी और फिर घटी। 2250 और 3750 kg/h की चूना प्रयोग दरों पर, ऑक्सालिक एसिड स्प्रे सांद्रता बढ़ने के साथ Rg1 की मात्रा घटी। ऑक्सालिक एसिड की समान सांद्रता पर, चूने की मात्रा बढ़ने पर, Rg1 की मात्रा पहले बढ़ी और फिर घटी। नियंत्रण की तुलना में, ऑक्सालिक एसिड की तीन सांद्रताओं और 750 kg/m2 चूने के उपचारों में Rg1 की मात्रा नियंत्रण से अधिक थी, अन्य उपचारों में पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में Rg1 की मात्रा नियंत्रण से कम थी। Rg1 की अधिकतम मात्रा 750 kg/h/m2 चूने और 0.1 mol/l ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव पर पाई गई, जो नियंत्रण से 11.54% अधिक थी (तालिका 4)।
2250 kg/h की प्रवाह दर पर ऑक्सालिक एसिड की स्प्रे सांद्रता और चूने की मात्रा बढ़ने पर, Rb1 की मात्रा पहले बढ़ी और फिर घटी। 0.1 mol L-1 ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव के बाद, Rb1 की मात्रा अधिकतम 3.46% तक पहुँच गई, जो ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव के बिना की तुलना में 74.75% अधिक थी। अन्य चूने के उपचारों के लिए, ऑक्सालिक एसिड स्प्रे की विभिन्न सांद्रताओं के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं देखा गया। 0.1 और 0.2 mol L-1 ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव के बाद, चूने की मात्रा बढ़ने पर, Rb1 की मात्रा पहले घटी और फिर घटी (तालिका 4)।
ऑक्सालिक एसिड की समान सांद्रता पर छिड़काव करने पर, चूने की मात्रा बढ़ने के साथ-साथ फ्लेवोनोइड्स की मात्रा पहले बढ़ी और फिर घटी। चूने के बिना और 3750 kg/m² चूने की मात्रा के साथ ऑक्सालिक एसिड की विभिन्न सांद्रताओं का छिड़काव करने पर फ्लेवोनोइड्स की मात्रा में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं पाया गया। 750 और 2250 kg/m² चूना मिलाने पर, छिड़काव किए गए ऑक्सालिक एसिड की सांद्रता बढ़ने के साथ-साथ फ्लेवोनोइड्स की मात्रा पहले बढ़ी और फिर घटी। 750 kg/m² चूना लगाने और 0.1 mol/l की सांद्रता पर ऑक्सालिक एसिड का छिड़काव करने पर, फ्लेवोनोइड्स की मात्रा अधिकतम 4.38 mg/g थी, जो समान मात्रा में चूना मिलाने की तुलना में 18.38% अधिक है, और ऑक्सालिक एसिड का छिड़काव करने की आवश्यकता नहीं थी। 0.1 मोल एल-1 ऑक्सालिक एसिड स्प्रे से उपचारित करने पर फ्लेवोनोइड्स की मात्रा में ऑक्सालिक एसिड के बिना उपचार और 2250 किलोग्राम/मी2 की खुराक पर चूने के साथ उपचार की तुलना में 21.74% की वृद्धि हुई (चित्र 5)।
कैडमियम तनाव के तहत पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ में फ्लेवोनोइड्स की मात्रा पर पत्तियों पर ऑक्सालेट के छिड़काव का प्रभाव
द्विवरीय विश्लेषण से पता चला कि पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में घुलनशील शर्करा की मात्रा, प्रयोग किए गए चूने की मात्रा और छिड़के गए ऑक्सालिक एसिड की सांद्रता पर महत्वपूर्ण रूप से निर्भर करती है। जड़ों में घुलनशील प्रोटीन की मात्रा, चूने और ऑक्सालिक एसिड की मात्रा के साथ महत्वपूर्ण रूप से सहसंबंधित थी। जड़ों में मुक्त अमीनो एसिड और प्रोलाइन की मात्रा, प्रयोग किए गए चूने की मात्रा, छिड़के गए ऑक्सालिक एसिड की सांद्रता, चूने और ऑक्सालिक एसिड के साथ महत्वपूर्ण रूप से सहसंबंधित थी (तालिका 5)।
पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में R1 की मात्रा, छिड़के गए ऑक्सालिक एसिड की सांद्रता, चूने की मात्रा और चूने एवं ऑक्सालिक एसिड के संयोजन पर महत्वपूर्ण रूप से निर्भर थी। फ्लेवोनोइड्स की मात्रा भी ऑक्सालिक एसिड स्प्रे की सांद्रता और चूने की मात्रा पर महत्वपूर्ण रूप से निर्भर थी।
पौधों में कैडमियम के स्तर को कम करने के लिए मिट्टी में कैडमियम को स्थिर करने हेतु कई संशोधकों का उपयोग किया गया है, जैसे चूना और ऑक्सालिक अम्ल³⁰। फसलों में कैडमियम के स्तर को कम करने के लिए चूने का व्यापक रूप से मृदा संशोधक के रूप में उपयोग किया जाता है³¹। लियांग एट अल.³² ने बताया कि ऑक्सालिक अम्ल का उपयोग भारी धातुओं से दूषित मिट्टी के उपचार के लिए भी किया जा सकता है। दूषित मिट्टी में ऑक्सालिक अम्ल की विभिन्न सांद्रताएँ मिलाने के बाद, मिट्टी में कार्बनिक पदार्थ की मात्रा बढ़ गई, धनायन विनिमय क्षमता कम हो गई और pH बढ़ गया³³। ऑक्सालिक अम्ल मिट्टी में मौजूद धातु आयनों के साथ भी अभिक्रिया कर सकता है। कैडमियम तनाव की स्थिति में, पैनाक्स नोटोजिनसेंग में कैडमियम की मात्रा नियंत्रण की तुलना में काफी बढ़ गई। हालांकि, चूने का उपयोग करने पर यह काफी कम हो जाती है। इस अध्ययन में जब 750 kg/h/m चूने का प्रयोग किया गया, तो जड़ों में कैडमियम (Cd) की मात्रा राष्ट्रीय मानक (Cd सीमा Cd≤0.5 mg/kg, AQSIQ, GB/T 19086-200834) तक पहुँच गई और इसका प्रभाव अच्छा रहा। 2250 kg/m2 चूने की मात्रा डालने पर सर्वोत्तम प्रभाव प्राप्त हुआ। चूने के प्रयोग से मिट्टी में Ca2+ और Cd2+ के लिए प्रतिस्पर्धा के कई केंद्र बन जाते हैं, और ऑक्सालिक अम्ल के प्रयोग से पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ों में Cd की मात्रा कम हो जाती है। चूने और ऑक्सालिक अम्ल के मिश्रण के बाद, पैनाक्स जिनसेंग की जड़ में Cd की मात्रा में उल्लेखनीय कमी आई और यह राष्ट्रीय मानक तक पहुँच गई। मिट्टी में मौजूद Ca2+ एक द्रव्यमान प्रवाह प्रक्रिया के माध्यम से जड़ की सतह पर अवशोषित हो जाता है और कैल्शियम चैनलों (Ca2+ चैनल), कैल्शियम पंपों (Ca2+-AT-Pase) और Ca2+/H+ एंटीपोर्टर्स के माध्यम से जड़ कोशिकाओं में अवशोषित होकर क्षैतिज रूप से जड़ों तक पहुँच जाता है। जाइलम23. जड़ों में Ca और Cd की मात्रा के बीच महत्वपूर्ण नकारात्मक सहसंबंध पाया गया (P < 0.05)। Ca की मात्रा बढ़ने के साथ Cd की मात्रा कम हो गई, जो Ca और Cd के बीच विरोध के विचार के अनुरूप है। ANOVA से पता चला कि चूने की मात्रा का Panax notoginseng की जड़ में Ca की मात्रा पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है। पोंग्रैक एट अल. 35 ने बताया कि Cd, कैल्शियम ऑक्सालेट क्रिस्टल में ऑक्सालेट से बंधता है और Ca के साथ प्रतिस्पर्धा करता है। हालांकि, Ca पर ऑक्सालिक एसिड का नियामक प्रभाव नगण्य था। इससे पता चलता है कि ऑक्सालिक एसिड और Ca2+ से कैल्शियम ऑक्सालेट का अवक्षेपण सरल अवक्षेपण नहीं है, और सह-अवक्षेपण प्रक्रिया कई चयापचय मार्गों द्वारा नियंत्रित हो सकती है।
कैडमियम तनाव के तहत, पौधों में बड़ी मात्रा में प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियाँ (ROS) बनती हैं, जो कोशिका झिल्लियों की संरचना को नुकसान पहुँचाती हैं।36 मैलोंडिएल्डिहाइड (MDA) की मात्रा का उपयोग ROS के स्तर और पौधों की प्लाज्मा झिल्ली को हुए नुकसान की मात्रा का आकलन करने के लिए एक संकेतक के रूप में किया जा सकता है।37 एंटीऑक्सीडेंट प्रणाली प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों को नष्ट करने के लिए एक महत्वपूर्ण सुरक्षात्मक तंत्र है।38 एंटीऑक्सीडेंट एंजाइमों (जिनमें POD, SOD और CAT शामिल हैं) की गतिविधियाँ आमतौर पर कैडमियम तनाव से प्रभावित होती हैं। परिणामों से पता चला कि MDA की मात्रा Cd सांद्रता के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबंधित थी, जो दर्शाता है कि Cd सांद्रता बढ़ने के साथ पौधों की झिल्ली लिपिड पेरोक्सीडेशन की मात्रा बढ़ती जाती है।37 यह ओयांग एट अल.39 के अध्ययन के परिणामों के अनुरूप है। यह अध्ययन दर्शाता है कि MDA की मात्रा चूने, ऑक्सालिक अम्ल और ऑक्सालिक अम्ल से काफी प्रभावित होती है। 0.1 मोल एल-1 ऑक्सालिक एसिड के नेबुलाइज़ेशन के बाद, पैनाक्स नोटोजिनसेंग में एमडीए की मात्रा कम हो गई, जिससे पता चलता है कि ऑक्सालिक एसिड पैनाक्स नोटोजिनसेंग में कैडमियम (Cd) की जैव उपलब्धता और आरओएस के स्तर को कम कर सकता है। एंटीऑक्सीडेंट एंजाइम प्रणाली वह स्थान है जहां पौधे का विषहरण कार्य होता है। एसओडी पौधे की कोशिकाओं में मौजूद ऑक्सीजन को हटाकर गैर-विषाक्त ऑक्सीजन और कम विषाक्त जल (H2O2) उत्पन्न करता है। पॉड और कैटेलिटिक एसिड पौधे के ऊतकों से जल (H2O2) को हटाते हैं और जल (H2O2) के अपघटन को उत्प्रेरित करते हैं। आईटीआरएक्यू प्रोटीओम विश्लेषण के आधार पर, यह पाया गया कि सीडी40 तनाव के तहत चूने के प्रयोग के बाद एसओडी और पीएएल के प्रोटीन अभिव्यक्ति स्तर में कमी आई और पॉड का अभिव्यक्ति स्तर बढ़ गया। पैनाक्स नोटोजिनसेंग की जड़ में कैटेलिटिक एसिड, एसओडी और पॉड की गतिविधियों पर ऑक्सालिक एसिड और चूने की मात्रा का महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ा। 0.1 मोल एल-1 ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव से एसओडी और कैटेलिटिक एसिड की गतिविधि में उल्लेखनीय वृद्धि हुई, लेकिन पीओडी गतिविधि पर इसका कोई स्पष्ट प्रभाव नहीं दिखा। इससे पता चलता है कि ऑक्सालिक एसिड कैडमियम तनाव के तहत आरओएस के अपघटन को तेज करता है और मुख्य रूप से कैटेलिटिक एसिड की गतिविधि को नियंत्रित करके एच2ओ2 के निष्कासन को पूरा करता है, जो स्यूडोस्पर्मम सिबिरिकम (कोस) के एंटीऑक्सीडेंट एंजाइमों पर गुओ एट अल.41 के शोध परिणामों के समान है। 750 किलोग्राम/घंटा/मी2 चूने के प्रयोग का एंटीऑक्सीडेंट प्रणाली के एंजाइमों की गतिविधि और मैलोंडिएल्डिहाइड की मात्रा पर प्रभाव ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव के प्रभाव के समान है। परिणामों से पता चला कि ऑक्सालिक एसिड के छिड़काव से पैनाक्स नोटोजिनसेंग में एसओडी और कैटेलिटिक एसिड की गतिविधियों को अधिक प्रभावी ढंग से बढ़ाया जा सकता है और पैनाक्स नोटोजिनसेंग की तनाव प्रतिरोधक क्षमता को बढ़ाया जा सकता है। 0.2 मोल एल-1 ऑक्सालिक एसिड और 3750 किलोग्राम एचएम-2 चूने के साथ उपचार द्वारा एसओडी और पीओडी की गतिविधियों में कमी आई, जो दर्शाता है कि ऑक्सालिक एसिड और Ca2+ की उच्च सांद्रता के अत्यधिक छिड़काव से पौधों में तनाव हो सकता है, जो लूओ और अन्य के अध्ययन के अनुरूप है। प्रतीक्षा करें 42.